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          2025年高考植物組織培養

          來源:網絡整理 2024-11-19 15:36:25

            1實驗室的準備工作

            本實驗需要作好三項實驗準備:一是提前配制各種母液;二是提前準備MS培養基;三是選擇外植體并進行預處理。

            1.1配制母液

            母液中含有大量元素、微量元素、激素(植物生物調節劑)和維生素等有機成分,母液濃度是實際溶液濃度的5~10倍。配制母液花費時間多,需要用到溶量瓶、移液管等精密儀器,無法由每位學生親自操作,教師可帶領部分學生在課外進行。母液的類型和配制順序如下:

            配制母液的注意事項:⑴自來水或河水中含有大量的礦質元素,勿用配制母液;⑵配制大量元素和微量元素母液時,應將每種化合物單獨溶解后,再一一混合,同時還應用適量的蒸餾水清洗燒杯內壁,并將清洗后的蒸餾水倒入混合溶液中,這樣可以保證每種元素的濃度,混合時要按照教材附表中的順序進行,最后加入的是氯化鈣溶液,這樣可以避免發生沉淀;⑶配制好的母液要先倒入1000ml燒杯中,再由燒杯轉入1000ml細口瓶中,不可由容量瓶直接倒入細口瓶中;⑷注意觀察母液中是否有絮狀物,出現絮狀物表明離子之間發生反應,需要重新配制母液;⑸植物生長調節劑難溶于水,需要堿或酸助溶,一般生長素類物質用堿(0.1mol/LNaOH1~3ml)或酒精(75~95%的酒精1~3ml)助溶,細胞分裂素類物質一般用酸(0.1mol/LHCL1~3ml)助溶,加入蒸餾水定溶時要緩慢,也可用水浴法助溶;⑹用棕色細口瓶盛裝有機物母液和植物生長調節劑母液,避免透射光損害母液中的有機成分;⑺在瓶壁上貼好各種母液的標簽(下圖所示);⑻將配制好的母液放入冰箱中或陰涼處保存。

            MS是穆拉希吉(Murashige)和斯庫克(Skoog)兩位科學家第一個字母的縮寫,他們于1962年為培養煙草而設計了一種培養基,這就是組培使用中最為廣泛的MS培養基;標簽中間一行的數字及單位表示的意義如下,例如,100ml/L,即配制1升培養基只需從母液中提取100ml即可;50mg/100ml,表明100ml母液中含有50mg萘乙酸,如取4mg的萘乙酸,只需提取8ml母液。

            除母液需提前配制好外,消毒液也需要提前配制好。外植體消毒一般采用75%的酒精、2~10%的次氯酸鈉溶液等。

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