高一生物教案：《探究影響酶活性的條件》教學(xué)設(shè)計(3)

　　第二課時

　　實驗設(shè)計

　　1．1 選用過氧化氫酶作為實驗探究對象: 過氧化氫是細(xì)胞中某些化學(xué)反應(yīng)的副產(chǎn)物，具有強氧化性，如果不及時除去或分解，就會殺死細(xì)胞。在動物的肝細(xì)胞和血細(xì)胞中含有較多的過氧化氫酶，它可以促進(jìn)過氧化氫分解。由于過氧化氫酶容易獲得且催化反應(yīng)的現(xiàn)象明顯，所以選用過氧化氫酶作為實驗探究對象。

　　1．2 設(shè)備準(zhǔn)備: 實驗用具有：試管四支(帶有單孔膠塞，在膠塞上另穿一細(xì)銅絲，銅絲的下端彎曲成水平的雙圓環(huán)形成一個自制的反應(yīng)匙，反應(yīng)匙上可放浸有H2O2酶的濾紙片，利用銅絲的上下活動控制反應(yīng)時間。)、移液管、鑷子、水槽、10 mL量筒、25 mL量筒等；反應(yīng)物為30％H2O2。

　　實驗中需要制作 H2O2酶濾紙片，制作方法是：將 10 g鮮肝剪碎，置于研缽中充分研磨，加入200 mL蒸餾水制成鮮肝液。然后，將5張濾紙疊加剪成5張大小相同面積大2 cm2的小片，平展在表面皿中，用鮮肝液浸泡l min后使用。

　　配制緩沖液：將17.96 g Na2HPO4·7H2O在 1 000 mL容量瓶內(nèi)溶于蒸餾水中，加水至刻度，配制成0.067 mol／L Na2HPO4溶液。將9.07 g KH2PO4在1 000 mL容量瓶內(nèi)溶于蒸餾水中，加水至刻度，配制成0.067 mol／L KH2PO4溶液。然后按下表用上述兩種溶液配制pH=5、pH=6、pH=7、pH=8緩沖液.

　　1．3 實驗步驟: 在多方查閱資料和師生共同實踐探索我們設(shè)計出現(xiàn)有實驗裝置(如右圖)，該裝置左側(cè)的試管用來完成酶催化H2O2 的分解反應(yīng)，右側(cè)的量筒用來計量排水后收集的氧氣的量。在此基礎(chǔ)上制定出簡單易行的且效果好的實驗步驟如下：

　　l）向水槽中加水至將滿為止；

　　2）將大小相同的5片濾紙片在鮮肝液中浸泡l min，然后用鑷子夾起濾紙片，靠在培養(yǎng)皿壁上，使多余的酶液流盡；

　　3）用5mL量筒向試管中加入 pH＝5的緩沖液 2 mL，然后再用移液管加入 2 mL 30％的H2O2溶液，用鑷子將1片酶濾紙片小心地放在用銅絲自制的反應(yīng)匙上。注意濾紙片不要碰到反應(yīng)試管壁，將軟膠塞塞緊試管口；

　　4）將25 mL量筒橫放于水槽中使之灌滿水，若有氣泡，將其輕輕傾斜，小心趕出氣泡。將量筒倒立，使筒口一直處于水中；

　　5）將自制銅絲反應(yīng)匙下降到試管內(nèi)液面下，使H2O2溶液接觸酶濾紙片。同時開始計時，在 30 S時，用鋼絲莢導(dǎo)氣皮管，將導(dǎo)氣管從量筒中拿出，松開鋼絲莢，讀取量筒水平面刻度并作出標(biāo)記后記錄。

　　6）取新的干凈試管，重復(fù)上述實驗過程，測量在 pH=6、pH=7、pH=8時過氧化氫在酶的催化下所釋放的氣體量。(注意：所有的實驗中都要嚴(yán)格保證干凈，不應(yīng)該有上一次反應(yīng)后的剩余溶液，每次試驗完后，應(yīng)充分沖洗量取緩沖液的量筒、自制反應(yīng)匙(至少三次)，然后用相應(yīng)的緩沖液再沖洗一遍。量取H2O2溶液的移液管不用洗)

　　1.4 實驗結(jié)果記錄表：

　　2、播放實驗演示錄像，讓學(xué)生了解實驗探究的過程。

　　3、學(xué)生開始實驗，教師給予巡回指導(dǎo)。

　　4、實驗結(jié)果的討論和分析推論

　　請各組同學(xué)選派一代表將本小組所得的實驗數(shù)據(jù)寫在黑板上的表格中，我們對全體實驗小組的實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析又會得到什么樣的推論？ 我們自己小組的實驗結(jié)果與全班同學(xué)實驗數(shù)據(jù)推導(dǎo)出的結(jié)論是否一致？你能否說出其中的原因？

　　5、課后思考題

　　1）我們所設(shè)計的實驗原理和目的是什么？實驗的自變量和因變量是什么？

　　2）能否根據(jù)你所記錄的實驗數(shù)據(jù)得到pH與酶的催化效率關(guān)系的變化曲線？你所繪出的曲線與課本上的有何不同？試說明理由。